Produção de anticorpos em coelhas jovens

Autores

  • Maria Cristina Fernandes Alvim Universidade Estadual de Campinas
  • Marcus Vinicius Costa Pedroni Universidade Estadual de Campinas
  • Anna Carolina Degan Passafaro Universidade Estadual de Campinas
  • Lília D’Souza-Li Universidade Estadual de Campinas

DOI:

https://doi.org/10.20396/sinteses.v1i3.7888

Palavras-chave:

Anticorpos. Peptídeos conjugados. Imunização. ELISA

Resumo

A padronização de uma técnica de produção de anticorpos em nosso laboratório, será de suma importância para a realização de inúmeras técnicas tais como Western Blot, Imunocitoquimícas e Imunohistoquímica.Objetivo: Produzir anticorpos específicos para as proteínas do receptor sensor de cálcio, receptor metabotrópico do glutamato 1, Vilip1 e Tubulina. Métodos: Foram usados peptídeos específicos para cada proteína, conjugados com KLH e duas coelhas por anticorpo. Após coleta de sangue periférico (tempo 0), foi injetado uma dose inicial de 250ng de peptídeo com adjuvante de Freund completo. Após 15 dias e 45 dias foram realizados reforços com 100 ng de peptídeo com adjuvante de Freund Incompleto. O sangue foi coletado após 15 dias de cada reforço e o soro armazenado a -80°C. Após o último reforço, a titulação dos anticorpos foi avaliada pelo método de ELISA com cada peptídeo aderido à microplaca e diferentes diluições de soro. Resultados: Comparado com a tempo 0, houve aumento significativo de resposta após a primeira imunização porém sem aumento posterior. Discussão: Diversas variáveis podem ter corroborado para nossos resultados. No início, tivemos muitas dificuldades, tais como acesso venoso, material inadequado, hemólise do sangue coletado e formação de granulomas no local de aplicação. Com mais experiência, foram melhorados o método para coleta de sangue, a escolha de material mais apropriado, e a técnica de aplicação. Conclusão: Daremos continuidade na produção de anticorpos, otimizando as condições tais como concentração de peptídeo e metodologias.

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Biografia do Autor

Maria Cristina Fernandes Alvim, Universidade Estadual de Campinas

UNICAMP/FCM – CIPED - Laboratório de Endocrinologia Pediátrica

Marcus Vinicius Costa Pedroni, Universidade Estadual de Campinas

UNICAMP/FCM – CIPED - Laboratório de Endocrinologia Pediátrica

Anna Carolina Degan Passafaro, Universidade Estadual de Campinas

UNICAMP/FCM – CIPED - Laboratório de Endocrinologia Pediátrica

Lília D’Souza-Li, Universidade Estadual de Campinas

UNICAMP/FCM – CIPED - Laboratório de Endocrinologia Pediátrica

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Publicado

2016-08-16

Como Citar

ALVIM, M. C. F.; PEDRONI, M. V. C.; PASSAFARO, A. C. D.; D’SOUZA-LI, L. Produção de anticorpos em coelhas jovens. Sínteses: Revista Eletrônica do SimTec, Campinas, SP, v. 1, n. 3, p. 192–193, 2016. DOI: 10.20396/sinteses.v1i3.7888. Disponível em: https://econtents.bc.unicamp.br/inpec/index.php/simtec/article/view/7888. Acesso em: 6 out. 2022.

Edição

Seção

Eixo 4 - Área Médica e Biológicas

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