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Produção de anticorpos em coelhas jovens
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Palavras-chave

Anticorpos. Peptídeos conjugados. Imunização. ELISA

Como Citar

ALVIM, Maria Cristina Fernandes; PEDRONI, Marcus Vinicius Costa; PASSAFARO, Anna Carolina Degan; D’SOUZA-LI, Lília. Produção de anticorpos em coelhas jovens. Sínteses: Revista Eletrônica do SimTec, Campinas, SP, v. 1, n. 3, p. 192–193, 2016. Disponível em: https://econtents.bc.unicamp.br/inpec/index.php/simtec/article/view/7888. Acesso em: 20 jul. 2024.

Resumo

A padronização de uma técnica de produção de anticorpos em nosso laboratório, será de suma importância para a realização de inúmeras técnicas tais como Western Blot, Imunocitoquimícas e Imunohistoquímica.Objetivo: Produzir anticorpos específicos para as proteínas do receptor sensor de cálcio, receptor metabotrópico do glutamato 1, Vilip1 e Tubulina. Métodos: Foram usados peptídeos específicos para cada proteína, conjugados com KLH e duas coelhas por anticorpo. Após coleta de sangue periférico (tempo 0), foi injetado uma dose inicial de 250ng de peptídeo com adjuvante de Freund completo. Após 15 dias e 45 dias foram realizados reforços com 100 ng de peptídeo com adjuvante de Freund Incompleto. O sangue foi coletado após 15 dias de cada reforço e o soro armazenado a -80°C. Após o último reforço, a titulação dos anticorpos foi avaliada pelo método de ELISA com cada peptídeo aderido à microplaca e diferentes diluições de soro. Resultados: Comparado com a tempo 0, houve aumento significativo de resposta após a primeira imunização porém sem aumento posterior. Discussão: Diversas variáveis podem ter corroborado para nossos resultados. No início, tivemos muitas dificuldades, tais como acesso venoso, material inadequado, hemólise do sangue coletado e formação de granulomas no local de aplicação. Com mais experiência, foram melhorados o método para coleta de sangue, a escolha de material mais apropriado, e a técnica de aplicação. Conclusão: Daremos continuidade na produção de anticorpos, otimizando as condições tais como concentração de peptídeo e metodologias.
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Copyright (c) 2016 Maria Cristina Fernandes Alvim, Marcus Vinicius Costa Pedroni, Anna Carolina Degan Passafaro, Lília D’Souza-Li

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