Resumo
Os sistemas de secreção do tipo VI são maquinarias de transporte de proteínas para células-alvo, que atuam em diversos aspectos da fisiologia bacteriana, incluindo virulência e competição com micro-organismos no ambiente. O sistema de secreção tipo seis (SSVI) de Xanthomonas citri pv. citri (X. citri) é essencial para a resistência da bactéria à ameba de solo Dictyostelium discoideum. X. citri é um importante fitopatógeno, que causa a doença cancro cítrico em todos os cultivares de citros importantes na atividade agrícola brasileira. Assim, é importante identificar os mecanismos moleculares de atuação do SSVI e as proteínas por ele secretadas (efetores), que conferem o fenótipo de resistência. O presente trabalho tem por objetivo identificar proteínas que interagem com os componentes do SSVI PAAR e VgrG, proteínas responsáveis pelo recrutamento de efetores para secreção. Para isso, utilizamos a metodologia de duplo híbrido em leveduras, buscando-se detectar interações de proteínas codificadas por biblioteca genômica de X. citri com as proteínas estruturais do SSVI VgrG e PAAR. Paralelamente, estamos realizando testes de interação direta entre duas proteínas que são fortes candidatas a efetores com PAAR e VgrG. Interações positivas foram obtidas em ensaios de duplo híbrido com biblioteca genômica de X. citri usando-se as proteínas VgrG e PAAR como iscas e o projeto encontra-se atualmente em fase de identificação destas interações por sequenciamento dos clones positivos.
Referências
2. Bayer-Santos E, Lima L dos P, Ceseti L de M, Ratagami CY, de Santana ES, da Silva AM, et al. Xanthomonas citri T6SS mediates resistance to Dictyostelium predation and is regulated by an ECF ? factor and cognate Ser/Thr kinase. Environ Microbiol [Internet].
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