Caracterização funcional dos genes regulados pelo fator sigma alternativo Ecfl em Xanthomonas citri pv citri

Resumo

O laboratório vem realizando a caracterização funcional de um fator sigma alternativo, EcfL, que é codificado por gene presente próximo ao cluster que codifica um Sistema de Secreção do Tipo VI desta bactéria, um sistema de transporte de proteínas para células-alvo eucarióticas ou procarióticas. Os resultados mostram que o regulon de EcfL consiste em três genes, dois deles codificando proteínas de função desconhecida. Além disto, a super-expressão de EcfL tem efeito bacteriostático em X. citri. Com isso, esse estudo tem como objetivo analisar os efeitos da super-expressão individual de cada um dos genes do regulon de EcfL no crescimento de X. citri. Os resultados obtidos demonstram que a super-expressão do gene que codifica uma fosfatase ácida não tem efeito bacteriostático na X. citri. Além disto, observou-se que a super-expressão não promove crescimento em meio contendo ácido fítico como agente quelante de metais, indicando que a fosfatase ácida não atua na degradação deste possível substrato nas condições analisadas. Uma vez que EcfL tem características de fator sigma que atua em resposta a carência de ferro, foi realizada a construção de um mutante do gene fur, que codifica um repressor da resposta de carência deste metal. A linhagem foi caracterizada por meio de curvas de crescimento e não apresentou nenhuma mudança no perfil de crescimento comparada a linhagem selvagem.